[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: دوره 11، شماره 1 - ( 1-1401 ) ::
جلد 11 شماره 1 صفحات 0-0 برگشت به فهرست نسخه ها
بهینه‌سازی بیان، تخلیص و ارزیابی طیف ‌سنجی فلوئورسانس آنزیم کراتیناز در حضور نانوذرات طلا
مهدی عبداله زاده پارسا1، سامان حسینخانی2، شیرین جلیلی3، فرشته رحمتی*4
1- گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
2- گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
3- مرکز تحقیقات علوم و فناوری‌های زیستی و سلامت در پلیس، معاونت بهداشت، امداد و درمان، فرماندهی انتظامی، تهران، ایران
4- گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران ، noora_1232003@yahoo.com
چکیده:   (168 مشاهده)
اهداف: امروزه استفاده از روش‌های بر پایه واکنش‌های آنزیمی با هدف پایش سلامت افراد به خصوص در حوزه نیروهای نظامی و انتظامی رواج گسترده‌ای یافته است. یکی از روش‌های آنزیماتیک، استفاده از آنزیم کراتیناز برای سنجش کراتین و کراتینین در مایعات جهت بررسی سلامت کلیه‌ها، عضلات و غده تیروئید است. هدف این تحقیق بهینه‌سازی بیان آنزیم کراتیناز و بررسی اثر نانوذرات طلا بر پایداری آنزیم کراتیناز بود.
مواد و روش‌ها: این پژوهش در بهار و تابستان سال 1400 در مؤسسه الکتروشیمی واقع در دانشگاه تهران انجام شد. در این مطالعه ابتدا باکتری E.Coli BL21 حاوی وکتور تکثیری pET28a در محیط TB کشت شد، سپس در دماهای 18، 22، 28، 32 و 37 درجه القا گردید. در ادامه پس از سونیکاسیون، تخلیص آنزیم‌ها با کروماتوگرافی تمایلی انجام شد. پس از تأیید بیان با SDS-PAGE، غلظت آنزیم‌های بیان‌شده در دماهای القای متفاوت با روش برادفورد اندازه‌گیری و مقایسه شد. در ادامه فعالیت آنزیم‌ها با روش رنگ‌سنجی بررسی و مقایسه گردید. نهایتاً با روش طیف‌سنجی فلورسانس، اثر نانوذرات طلا بر ساختار آنزیم کراتیناز مورد بررسی قرار گرفت.
یافته‌ها: بررسی میزان بیان آنزیم کراتیناز در دماهای مختلف در محیط کشت TB نشان داد که در دمای 28 درجه، بیشترین مقدار آنزیم با بالاترین میزان فعالیت حاصل شد. از طرفی طیف‌سنجی فلورسانس آنزیم کراتیناز در حضور و عدم حضور نانوذرات طلا در طول موج تهییج 295 نانومتر، کاهش شدت فلورسانس در حضور نانوذرات طلا را نشان داد.
نتیجه‌گیری: القای بیان در 28 درجه‌ سانتی‌گراد در محیط کشت TB، آنزیمی فعال‌تر و غلیظ‌تر ارائه می‌دهد. همچنین نانوذرات طلا باعث کاهش شدت فلورسانس آنزیم شد که می‌تواند نشانگر تغییر در ریزمحیط آمینواسید فلورسانت در ساختار آنزیم کراتیناز باشد.
شماره‌ی مقاله: 18
واژه‌های کلیدی: کراتیناز، آنزیم، تخلیص، طلا، نانوذرات، طیف‌سنجی فلورسانس
متن کامل [PDF 609 kb]   (52 دریافت)    
نوع مقاله: پژوهشی اصيل | موضوع مقاله: فناوری‌های مرتبط با طب انتظامی
دریافت: 1400/10/17 | پذیرش: 1400/11/16 | انتشار: 1401/1/27
چکیده گسترده [HTM 43 KB]  (9 دریافت)
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Abdollahzadeh Parsa M, Hosseinkhani S, jalili S, Rahmati F. Expression Optimization, Purification, and Fluorescence Spectroscopic Assessment of Creatinase Enzyme in the Presence of Gold Nanoparticles. J Police Med. 2022; 11 (1)
URL: http://jpmed.ir/article-1-1069-fa.html

عبداله زاده پارسا مهدی، حسینخانی سامان، جلیلی شیرین، رحمتی فرشته. بهینه‌سازی بیان، تخلیص و ارزیابی طیف ‌سنجی فلوئورسانس آنزیم کراتیناز در حضور نانوذرات طلا. نشریه طب انتظامی. 1401; 11 (1)

URL: http://jpmed.ir/article-1-1069-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 11، شماره 1 - ( 1-1401 ) برگشت به فهرست نسخه ها
نشریه علمی پژوهشی طب انتظامی Journal of Police Medicine
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 29 queries by YEKTAWEB 4410