fa تأثیر آفلاتوکسینB1 بر بیان ژن‌های B‌RCA1 وBRCA2 در شرایط کشت آزمایشگاهی رده سلولی نرمال اپیتلیال پستان نوع انسانی (HMEC) فناوری‌های مرتبط با طب انتظامی Police Medicine Related Technologies پژوهشی اصيل Original Research <p>مقدمه: آفلاتوکسین‌ها ترکیباتی سرطان‌زا هستند که توسط قارچ‌های Aspergillus flvaus و A. parasiticus تولید می‌شوند. در میان آفلاتوکسین‌های شناخته‌شده سرطان‌زایی آفلاتوکسین B1 بیشتر از سایر آفلاتوکسین‌ها می‌باشد. این سم می‌تواند با آلوده کردن مواد غذایی وارد بدن انسان و درنهایت بافت پستان شود. دو ژن مؤثر در سرکوب تومور در پستان، ژن‌های BRCA1 و BRCA2 می‌باشند که بیان این ژن‌ها می‌تواند توسط آفلاتوکسین B1 تحت تأثیر قرار گیرد. مواد و روش‌ها: به‌منظور بررسی تأثیر آفلاتوکسین B1 بر بیان ژن‌های BRCA1 و BRCA2، رده سلولی نرمال اپیتلیال پستان نوع انسانی (HMEC) به‌صورت تک لایه کشت داده شد. 10 روز پس از کشت تک لایه و رسیدن به تعداد سلول مناسب، سلول‌ها به‌منظور اعمال تیمارها به 16 فلاسک 2cm 25 (چهار تیمار هرکدام چهار تکرار) پاساژ داده شد. بعد از رشد سلول‌ها، سه تیمار 15، 25 و 35 میکرولیتری آفلاتوکسین B1 به فلاسک‌ها اضافه گردید. 24 ساعت پس از اعمال تیمارها سلول‌ها به‌منظور استخراج RNA، تبدیل به cDNA و انجام Real time PCR از فلاسک‌ها جدا شدند. به‌منظور بررسی قدرت زنده‌مانی سلول‌ها MTT تست صورت گرفت. یافته‌ها: نتایج این مطالعه نشان داد هر سه غلظت 15، 25 و 35 میکرولیتری سم سبب کاهش بیان ژن‌های BRCA1 و BRCA2 می‌شود (0/0001 < P). همچنین نتایج MTT تست نیز نشان داد قدرت زندمانی سلول‌ها با افزایش غلظت سم و مدت‌زمان تماس با سم کاهش می‌یابد. نتیجه‌گیری: با توجه به نتایج حاصله به نظر می‌رسد آفلاتوکسین B1 با کاهش بیان ژن‌های BRCA1 و BRCA2 می‌تواند خطر ابتلا به سرطان پستان را افزایش دهد.</p> <p>Background: Aflatoxins are carcinogenic compounds that are produced by Aspergillus flvaus and A. parasiticus fungi growing on foods. Among variety of known aflatoxins, aflatoxin B1 has been reported as the most carcinogenic compounds. This toxin can enter human body through contaminated food. The mammary tissue is one of the body tissues that aflatoxin B1 can penetrate. The BRCA1 and BRCA2 genes are two major effective genes mammary gland tumor suppression, so expression of these genes can be affected by aflatoxin B1. Materials and Methods: In order to evaluate the effects of aflatoxin B1 on BRCA1 and BRCA2 genes expression, normal Human Mammary Epithelial Cells (HMEC) were cultured as monolayer. After 10 days, monolayer cells culture reached suitable amount and was passaged for treatment to 16 flasks 25cm2 (four treatments with four replicates for each one). After proper cells growth, three treatments, 15, 25 and 35 &micro;l of aflatoxin B1 were added to the flasks and then, cells were separated for extraction of RNA, cDNA and Real time PCR performance after 24 hours. MTT assay was performed to measure cell viability. Results: The results showed that all three concentrations decreased the expression of BRCA1 and BRCA2 genes (P<0.0001). In addition, the results of MTT assay showed that cell viability was reduced with increasing concentration of toxin and duration of exposure. Conclusion: According to the results, it seems that aflatoxin B1 can increase the risk of breast cancer by reducing expression of BRCA1 and BRCA2 genes.</p> آفلاتوکسین B1, پروتئین BRCA1, پروتئینBRCA2 ,real-time Polymerase chain reaction. aflatoxin B1, BRCA1 protein, BRCA2 protein, real-time polymerase chain reaction 211 220 http://jpmed.ir/browse.php?a_code=A-10-395-1&slc_lang=fa&sid=1 Saeedeh Moradi سعیده مرادی i.sa86@yahoo.com 10031947532846009583 10031947532846009583 No MSc, Animal physiology, Department of Animal science, University of Zanjan, Zanjan, Iran کارشناس ارشد، فیزیولوژی دام، گروه علوم دامی، دانشگاه زنجان، زنجان، ایران Hamezeh Azari حمزه آذری Hamzeh.Azari25@gmail.com 10031947532846009584 10031947532846009584 No MSc, Animal physiology, Department of Animal science, University of Zanjan, Zanjan, Iran کارشناس ارشد، فیزیولوژی دام، گروه علوم دامی، دانشگاه زنجان، زنجان، ایران Iraj Jafari Anarkooli ایرج جعفری انارکولی Anarkool@zums.ac.ir 10031947532846009585 10031947532846009585 No Assistant Professor, Anatomical Sciences, Department of Anatomy, Zanjan university of Medical Sciences, Zanjan, Iran استادیار، گروه علوم تشریحی، دانشگاه علوم پزشکی زنجان، زنجان، ایران Babak Qasemi-Panahi بابک قاسمی پناهی Babkpanahi98@yahoo.com 10031947532846009586 10031947532846009586 No Assistant Professor of Animal Reproduction, Department of Animal Science, University of Tabriz, Tabriz, Iran استادیار، دانشگاه تبریز، دانشکده کشاورزی، گروه علوم دامی، تبریز، ایران Somayeh Elhami سمیه الهامی Elhami67@yahoo.com 10031947532846009587 10031947532846009587 No MSc, Animal Genetics, Department of Animal Science, University of Zanjan, Zanjan, Iran کارشناسی ارشد ژنتیک دام، دانشگاه زنجان، گروه علوم دامی، زنجان، ایران Ali Forouharmehr علی فروهرمهر forouharmehr@yahoo.com 10031947532846009588 10031947532846009588 Yes Ph.D Candidate, Animal Genetics, Department of Animal Science, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran دانشجوی دکترا تخصصی ژنتیک دام، دانشگاه فردوسی مشهد، گروه علوم دامی، مشهد، ایران